TCSPC
Time Correlated Single Photon Counting, time domain FLIM, tdFLIM
Bei der zeitkorrelierten Einzelphotonen-Zählung (TCSPC) werden Fluoreszenzabklingvorgänge über die Zeitachse gemessen. Das Verfahren ist ein wesentlicher Bestandteil der Fluoreszenzlebensdauer-Mikroskopie (FLIM).
Die zeitkorrelierte Einzelphotonen-Zählung gilt als besonders schonende Messtechnik, da die zur Probenanregung erforderlichen Lichtimpulse eine geringe Impulsenergie aufweisen. Dies ist möglich, weil jeweils nur ein einzelnes Photon verarbeitet wird. TCSPC basiert auf der Detektion dieser einzelnen Photonen und der Messung ihrer Ankunftszeiten in Bezug auf ein Referenzsignal, das in der Regel der Zeitpunkt der Emission des Laserimpulses ist, mit dem die Probe angeregt wurde. Dieser Laserimpuls erfolgt mit einer hohen Wiederholungsrate, sodass eine ausreichend hohe Anzahl einzelner Photonen für die anschließende Messung der Fluoreszenzlebensdauer bestimmt werden kann.